凡未接種過牛痘而又接觸了天花病人且在10～14日內(nèi)發(fā)病者，全部可考慮本病，如果再出現(xiàn)典型皮疹，即可診斷。根據(jù)其皮疹的形態(tài)，分布及發(fā)展過程等特點(diǎn)，結(jié)合流行學(xué)病情況，典型病例診斷不難。疑難病例的確診，有賴于病毒與血清免疫學(xué)的檢查。

　　1、血象 前驅(qū)期白細(xì)胞總數(shù)略低，淋巴細(xì)胞相對(duì)增多。膿皰期白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞增多。

　　2、血清學(xué)檢查 可用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)、中和試驗(yàn)檢測(cè)患者血清是否存在有特異性抗體，以幫助診斷。

　　(1)取皰疹、膿皰液或痂皮研碎后的懸液，用高價(jià)免疫血清檢測(cè)天花病毒抗原。

　　(2)取患者的鼻咽分泌物、血液、皰疹液或痂皮懸液進(jìn)行病毒分離。血清學(xué)試驗(yàn)(血凝抑制試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合及中和試驗(yàn))亦有助于診斷。

　　天花患者早在病程第4天，血清中即可出現(xiàn)天花病毒抗體;于病后第7天，絕大部分患者補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)呈陽性反應(yīng)。第10～11天效價(jià)可達(dá)1∶640。而有種痘史的非天花患者，效價(jià)很少超過1∶40;但是，倘若有種痘史的可疑患者在病程后期血清抗體效價(jià)比早期增長(zhǎng)4倍，則具診斷價(jià)值。

　　病理變化：表皮有網(wǎng)狀變性、氣球狀變性或凝固性壞死。因網(wǎng)狀變性比較明顯，故大多產(chǎn)生多房性水皰。早期受累的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可找到Guamieri小體，為圓形或卵圓形，呈嗜伊紅性及Feulgen陽性，周圍常繞以不著色的透明區(qū)。此外，在陳舊皮損內(nèi)常見到核內(nèi)嗜伊紅包涵體，真皮內(nèi)除有輕度炎癥反應(yīng)外，有時(shí)見出血。

　　3、病原體檢查

　　(1)直接涂片檢查天花病毒包涵體：取皰疹液、或皰疹潰瘍底部拭子涂于玻片上，干燥后用蘇木精-伊紅(H-E)染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察上皮細(xì)胞的胞質(zhì)。若系天花患者，可在其中查見天花病毒嗜酸性包涵體。但是，涂片陰性不能排除天花。

　　(2)電鏡檢查：自病變部取材，用電鏡觀察，天花病毒呈磚形，數(shù)小時(shí)內(nèi)可確診。

　　(3)雞胚接種或細(xì)胞培養(yǎng)：取皰疹液、痂皮懸液、血或鼻咽部分泌物，接種于雞胚絨毛尿囊膜分離病毒;或接種猴腎細(xì)胞或羊膜細(xì)胞作培養(yǎng)，12h后即可見到多數(shù)微小包涵體，48h后包涵體顯著增大，有時(shí)可見核內(nèi)包涵體。