動物細(xì)胞培養(yǎng)(animal cell culture)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細(xì)胞(使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶)然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和增殖。今天和大家分享一下動物體細(xì)胞培養(yǎng)原理,一起來看看吧。
動物體細(xì)胞培養(yǎng)原理
1、動物細(xì)胞培養(yǎng)原理是細(xì)胞增殖。
2、動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細(xì)胞(使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶)然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和增殖。
細(xì)胞培養(yǎng)是指細(xì)胞在體外條件下的生長,動物細(xì)胞在單獨細(xì)胞培養(yǎng)的過程中不再形成個體。
基本過程
取動物胚胎或幼齡動物器官、組織。將材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用膠原蛋白酶)處理(消化),形成分散的單個細(xì)胞,將處理后的細(xì)胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到互相接觸時,細(xì)胞就會停止分裂增殖,出現(xiàn)接觸抑制。此時需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。另外,原代培養(yǎng)就是從機體取出后立即進(jìn)行的細(xì)胞、組織培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞從動植物中生長遷移出來,形成生長暈并增大以后,科學(xué)家接著進(jìn)行傳代培養(yǎng),即將原代培養(yǎng)細(xì)胞分成若干份,接種到若干份培養(yǎng)基中,使其繼續(xù)生長、增殖。通過一定的選擇或純化方法,從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞稱為細(xì)胞株。當(dāng)培養(yǎng)超過50代時,大多數(shù)的細(xì)胞已經(jīng)衰老死亡,但仍有部分細(xì)胞發(fā)生了遺傳物質(zhì)的改變出現(xiàn)了無限傳代的特性,即癌變。此時的細(xì)胞被稱為細(xì)胞系。
培養(yǎng)基添加胰島素可促進(jìn)細(xì)胞對葡萄糖的攝取
分類
1 根據(jù)細(xì)胞種類:原代細(xì)胞培養(yǎng), 傳代細(xì)胞培養(yǎng)
原代細(xì)胞:將動物各種組織從機體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA) 或機械方法處理,分散成單細(xì)胞,在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養(yǎng)。培養(yǎng)的細(xì)胞為正常的動物細(xì)胞,一般培養(yǎng)10代后不再增殖,死亡。
傳代細(xì)胞:傳代培養(yǎng)是細(xì)胞培養(yǎng)常規(guī)保種方法之一,也是所有細(xì)胞生物學(xué)實驗的基礎(chǔ)。當(dāng)細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶,細(xì)胞才能繼續(xù)生長,這一過程就叫傳代。傳代培養(yǎng)可獲得大量供實驗所需細(xì)胞。細(xì)胞傳代要在嚴(yán)格的無菌條件下進(jìn)行,每一步都需要認(rèn)真仔細(xì)地?zé)o菌操作。培養(yǎng)的細(xì)胞為癌變或人為癌化的細(xì)胞,理論上可以無限增殖。癌化的方式有很多:進(jìn)行癌基因突變,感染病毒,從癌癥供體體內(nèi)分離,物理或化學(xué)方法(如紫外,化學(xué)試劑)等。
2 根據(jù)培養(yǎng)方式:貼壁細(xì)胞培養(yǎng),半懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
以上就是關(guān)于動物體細(xì)胞培養(yǎng)原理的分享,希望能夠幫助到你。
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